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猪札如病毒札幌病毒PCR檢測試劑盒

猪札如病毒札幌病毒PCR檢測試劑盒

加勒比海盗成人版下载時間:2019-07-18

簡要描述:

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加勒比海盗成人版下载介紹:

加勒比海盗成人版下载名稱:猪札如病毒札幌病毒PCR檢測試劑盒

英文名称:Porcine Sapovirus(PoSaV)()RTPCR

 

准備物品:

清理液(A)                                    毫升

染色液(t B)                                  微升

稀释液(C)                                    毫升

溶解液(tD)                                   毫升

加勒比海盗成人版下载说明书                                      1份

 

注意事項:

1.基礎程序

2.擴增溫度和延伸溫度

3.反應時間

4.循環次數

5.PCR 反应液的配制

6.PCR技術的基本原理

7.PCR的反應動力學

8.PCR擴增産物

9.PCR反應體系與反應條件。

 

反應五要素:

參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

① 引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

② 引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③ 引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④ 避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤ 引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥ 引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦ 引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

猪札如病毒札幌病毒PCR檢測試劑盒 引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量産生所需要的結果爲好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

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